达学堂·答疑讨论
Q:福尔马林固定用多少量呢,和胸水比例是多少?
答:新冠疫情期间细胞学标本首选经福尔马林固定后4-6小时后制成细胞蜡块。我们实验按照细胞学标本:100%福尔马林原液体积比为10∶1的比例加入100%福尔马林固定液,混匀后(此时,细胞学标本中福尔马林浓度约为10%)固定4~6 h后再离心。
Q:冷丙酮起固定和硬化的作用吧?
答:冷丙酮的作用就是固定硬化成块。
Q:请问血性胸腹水破红的方法,和试剂的配比是怎样的?
答:末次离心时加入PBS缓冲液进行稀释,沉渣加10 ml液基保存液/冰醋酸→去除红细胞黏液等相关背景→离心沉淀。
Q:请问丙酮在哪里购买的,丙酮挥发怎样解决?我们这里公安局会定期来检查,用丙酮很不方便。
答:我们将丙酮放至4度冰箱冷藏,双层瓶盖封好的情况下一般挥发还好。
Q:请问冷丙酮在细胞蜡块制作中的作用及原理是什么?
答:冷丙酮在细胞蜡块制作中的作用是固定成块,丙酮的固定的原理是使细胞内蛋白质凝固,终止或抑制细胞内酶促反应,防止细胞自溶,以保持组织固有的形态结构,更重要的是保持细胞的抗原性。
Q:如果患者有不明原因的胸腔或腹腔积液,可以检测出其中是否含有癌细胞?
答:首先在收到胸腹水标本之后先制作出细胞蜡块,在镜下先看是否有癌细胞,如果有,会进行免疫组化来进行确诊。如果用细胞涂片,是可以判断出有癌细胞,但是不能看出癌细胞的来源。而制作细胞蜡块的话是可以明确诊断癌细胞的来源。
Q:冷丙酮一定要是冷的吗?常温保存的丙酮能直接用来制作蜡块么?
答:一般丙酮放在4℃冰箱保存,因为冷丙酮可以减少细胞的肿胀,所以一般用冷丙酮。不过常温保存的丙酮应该也是可以的,可以去用实验比较一下两者之间的区别。